بررسی فولیکول های آنترال تخمدانی برای تعیین غلظت اسید آلفا- لینولنیک موثر بر توانایی تکوین برون تنی اووسایت های بز

اسیدهای چرب غیراشباع با چند باند دوگانه فزون بر نقش انرژی­زایی با تاثیر بر بافت ­ های تولید­مثلی از جمله اثر بر فولیکول ­ های تخمدان و جسم زرد و همین­طور مهیا نمودن پیش­ساز ­ های سنتز ترکیباتی نظیر استروئید­ها و پروستاگلاندین­ها بر تولید­مثل موثر هستند. در این مطالعه اسید آلفا-لینولنیک ( آلفالین ) به محیط کشت بلوغ برون تنی اووسایت­های بز افزوده شد تا اثر آن بر توانایی تکوین آنها بررسی شود. لذا، ابتدا مایع فولیکولی از فولیکول­های کوچک و بزرگ تخمدان­های بز جمع­آوری شد تا مقدار آلفالین آنها به روش کروماتوگرافی گازی اندازه گیری شود. نتایج این آزمایش اولیه نشان داد که غلظت آلفالین از فولیکول­های کوچک (6/64 میکرو­مولار) به فولیکول­های بزرگ (6/100 میکرو­مولار) افزایش یافت (05/0 ˂ p ). سپس با توجه به غلظت آلفالین در مایع فولیکولی فولیکول­های کوچک و بزرگ ، اووسایت­ ها در حضور غلظت های صفر (شاهد)، 10 (آلفالین-10)، 50 (آلفالین-50)، 100 (آلفالین-100) و 200 (آلفالین-200) میکرومولار کشت داده شدند. 24 ساعت پس از بلوغ برون تنی، گسترش سلول­های کومولوس اووسایت ها و راندمان رسیدن آنها به مرحله­ی متافاز میوز-2 بررسی شد. در ادامه اووسایت­های تیماری از آلفالین که بیشترین بلوغ برون تنی را نشان داد به روش پارتنوژنز فعال شدند و درصد تسهیم و تولید بلاستوسیست آنها با گروه شاهد مقایسه شد. داده­ها در هر مرحله ثبت و به روش آزمون­ مقایسه­ی میانگین­ها و یا کای دو با استفاده از نرم­افزار sas آنالیز شدند. افزودن آلفالین به محیط کشت بلوغ برون­تنی اووسایت­ها اثری بر گسترش سلول­های کومولوس نداشت (05/0˃ p ) و تنها در بیشترین غلظت (آلفالین-200) مقدار گسترش سلول­های کومولوس را کاهش داد (05/0 ˂ p ). درصد بلوغ برون تنی اووسایت­ها در گروه آلفالین-50 افزایش معنی­داری (05/0 ˂ p ) را در مقایسه با گروه شاهد نشان داد (1/68% در مقابل 2/57%). افزودن 50 میکرومولار آلفالین به محیط کشت بلوغ برون تنی اووسایت­ها همچنین درصد تسهیم (2/65 %) و تولید بلاستوسیست (1/25%) را در مقایسه با گروه شاهد بهبود بخشید (به ترتیب 8/52% و 7/16%، 05/0 ˂ p ). به طور کلی، نتایج این مطالعه­ی نشان داد که افزودن غلظت مناسب آلفالین به محیط کشت بلوغ برون تنی می­تواند راندمان بلوغ، درصد تسهیم و تولید بلاستوسیست را در اووسایت­های بز افزایش دهد.